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关于western blot实验的原理（为什么要做这个实验），实验结果怎么看。以及做不出想要的结果该怎么办，这些问题你可以看下我今天的分享。 另外如果你想系统的学习western blot实验，你可以学习下我分享这些关于Western blot实验技术的学习资料，链接分享给你。
Western印迹法（Western blot）或称“蛋白质转渍法”、“免疫印迹法”（immunoblot），是在分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法，也是HIV检测的方法之一。
Western blot的操作流程中大部分都用到TBST洗液，而且还是封闭，一抗二抗孵育这种比较关键的步骤。 通常Tween-20作为一种非离子型表面活性剂，效果和SDS、BSA作用差不多，主要是封闭膜上蛋白的非结合位点，以降低背景，增强抗体的特异性结合。
qRT-PCR检测得是mRNA水平表达，而western检测得是蛋白水平表达。 可是蛋白不就是由mRNA翻译出来的么？ 表达水平应该与mRNA接近甚至相同啊！
相信很多人在做 Western blot 实验时，会遇到各式各样奇怪的现象，可谓是”好看的结果千篇一律，有趣的条带五花八门”，暂且把它们看作是枯燥科研中的小点缀吧~ 为了让大家少走弯路！
Western Blot（简称WB），蛋白质免疫印迹法，是基于蛋白质SDS-PAGE电泳分离和特异性抗体识别蛋白的特性，通过显色技术，以达到检测目的蛋白的技术。 该技术广泛应用于定性检测蛋白水平的表达，活性分析与鉴定。
在科研狗的Western blot讨论群中，有位同学提出了如下非常深刻和有水平的问题： “WB跑成这样，是怎么回事？（图片见上）” 一看到有人提问，群里的各路英雄好汉摩拳擦掌，准备一展身手。 “有可能是胶没有凝固均匀” “有可能是电压不稳定”
Marker的作用主要是用来指示蛋白条带所对应的分子量大小，只有标准量精确无误了，实验结果才有说服力，除此之外，蛋白Marker还有显示转膜是否成功、以及蛋白在凝胶上的电泳程度等作用，因此选择正确的蛋白Marker也是Western Blot实验成功的必要条件之一。
蛋白质免疫印迹（Western Blot，WB ）需要选择一种蛋白作为内参蛋白。内参就是内部参照，一般是指管家基因编码表达的蛋白，它们在各个组织和细胞中的表达相对恒定，在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做内参。
western blot 裁膜问题? 在其他经验贴查到很多杂志要求整张膜敷抗体的图像，那就意味着western blot转膜结束后要敷目的显影，而后用抗体洗脱液，再敷内参显影。